각종 암에 옻의 항암 효과, 세포 실험, 한약 처방

옻나무와 toxicodendron vernicifluum으로도 알려진 RVS (Rhus Verniciflua Stokes)는 고대부터 한방에서 사용되는 아시아 토착 식물입니다. 

그것은 주로 위장 질환 (고대부터 위염, 위암 및 죽상 동맥 경화증)의 치료에 사용되었습니다.

 

임상 연구에서 Rhus verniciflua stokes는 대장암, 위암, 간암, 신장암, 췌장암 및 폐암과 같은 다양한 암 환자에 대한 효능을 보여주었습니다.

https://www.hindawi.com/journals/mi/2014/154561/#B12

 

Rhus verniciflua Stokes가 잠재력을 보인 가장 일반적인 암 유형은 간, 혈액, 유방, 뼈 및 위의 암 유형입니다

 

Rhus verniciflua Stokes는 여러 유형의 암에 대한 잠재력을 보여주었습니다.

 

백혈병

Rhus verniciflua Stokes 추출물은 인간 만성 골수성 백혈병 K562 세포에서 세포 성장 및 세포 사멸을 억제합니다.   ( 참고 .)

우리는 인간 만성 골수성 백혈병 K562 세포에서 Rhus verniciflua Strokes (R. verniciflua) 추출물의 영향을 매개하는 메커니즘을 조사했습니다.

여기에는 세포주기 정지와 관련된 카스파제 의존성 세포 사멸 경로와 핵 인자 NF-의 억제가 포함됩니다.

 

R. verniciflua 추출물은 NF-κB의 활성화와 ERK의 인산화를 억제했습니다.

총괄적으로, 이러한 결과는 R. verniciflua 추출물이 caspase-3 과발현과 NF-κB 및 MAPK 신호 전달의 조절을 통해 세포 사멸 과정을 활성화함으로써 인간 만성 골수성 백혈병 K562 세포의 증식을 억제했음을 나타냅니다.

 

R. verniciflua는 여수 (한국)에서 자란 R. verniciflua는 경희 약품 (한국 원주)에서 구입 하였다.

먼저 R. verniciflua 1kg을 180 ° C에서 1 시간 동안 로스팅한 다음 멸균 증류수로 3 시간 동안 두 번 추출했습니다.

상층액을 증발시키고 동결 건조하여 추출물을 분말 43g으로 얻었다 (수율 4.3 %).

고성능 액체 크로마토 그래피 (HPLC)를 사용한 성분 분석 결과 피세틴이 R. verniciflua 추출물의 주요 성분중 하나임이 밝혀졌습니다.

 

 

림프종

Rhus verniciflua Stokes 추출물은 인간 림프종 세포의 성장을 억제 할 수 있습니다.  ( 참고 .)

식품 첨가물 및 전통 한약재로 사용되는 RVS (Rhus verniciflua Stokes)는 함유된 폴리 페놀 화합물과 밀접한 관련이 있는 것으로 알려진 항산화 및 항 종양 활성을 모두 가지고 있습니다. 

본 연구에서는 RCMF (RVS 클로로포름-메탄올 분획)라고하는 RVS의 미정제 아세톤 추출물에서 분획을 정제하고 자유 라디칼을 제거하고 세포 성장을 억제하는 능력을 평가했습니다. 

RCMF가 항산화 잠재력을 포함하고 B 림프종 세포의 증식 능력을 강력하게 억제하는 것으로 나타났습니다.

마지막으로, EI-MS, 1H-NMR 및 13C-NMR 스펙트럼은 RCMF에 프로토 카테츄산, 푸스틴, 피세틴, 설퍼틴 및 부테인을 포함한 플라보노이드 유도체가 포함되어 있음을 확인하였다.

이러한 플라보노이드 유도체가 항산화 및 RCMF의 항 증식 활성이 있다.

 

 

위암

PI3K-Akt / PKB 생존 경로의 억제는 AGS 위암 세포주에서 미토콘드리아 경로를 통해 Rhus verniciflua Stokes 유도 세포 사멸 의 에탄올 추출물을 향상 시켰습니다.  ( 참고1 )

RVS ( Rhus verniciflua Stokes)는 위염과 위암의 치료를 위해 전통적인 동아시아 의학에서 사용되어 왔지만 생물학적 활성에 대한 메커니즘은 아직 밝혀지지 않았습니다. 

우리는 이전에 AGS 인간 위암 세포에서 Skp2 감소 및 세포 사멸에 의해 제어되는 p27Kip1의 축적을 통해 RVS-유도 G1세포주기 정지의 에탄올 추출물을 확립했습니다 .

 

종합하면, 이 결과는 RVS의 에탄올 추출물이 정상 세포가 아닌 인간 위암 세포에서 미토콘드리아 사멸 경로를 통해 아폽토시스를 유도하고 PI3K-Akt / PKB 경로의 억제가 미토콘드리아 사멸 경로를 강화했음을 시사한다.

 

 

Rhus verniciflua Stokes 추출물은 인간 위선암 AGS 세포의 이동과 침입을 억제합니다.

(참고2) 2020년 10월 발표.

많은 연구에서 RVS ( Rhus verniciflua Stokes)와 그 추출물이 항암제임을 시사했습니다 . 

그러나 RVS는 알레르기성 독소인 우루시올을 함유하고 있어 사용이 제한적이었습니다. 

기존의 알레르겐 제거 추출 방법을 개선하여 플라보노이드 함량이 높은 새로운 알레르겐 없는 Rhus verniciflua Stokes 추출물 (RVSE)을 개발했습니다 .

 

이 연구에서 우리는 RVSE가 AGS 위암 세포의 이동 및 침입 능력을 억제하는지 여부를 조사했습니다.

 

RVSE의 플라보노이드 함량은 HPLC로 분석했습니다. 

0-100 μg / mL 용량의 RVSE 처리는 AGS 세포의 이동 및 침입 능력을 감소 시켰습니다. 

특히, RVSE 처리는 MMP-9 및 uPA의 발현과 STAT3의 인산화를 강력하게 억제했습니다. 

대조적으로, RVSE 처리는 PAI-1의 발현을 극적으로 증가시켰다. 

이러한 결과는 MMP-9 및 uPA 발현 및 STAT3 인산화의 억제 및 PAI-1 발현의 자극이 RVSE로 처리된 AGS 세포의 감소 된 이동 및 침입에 기여함을 나타낸다.

이러한 결과는 RVSE가 위암 전이를 감소시키는 천연 약초로 사용될 수 있음을 시사합니다.

 

RVSE 준비

한국 춘천에서 재배된 건조 RVS는 한약 가게 (한국 춘천)에서 구입했습니다.

건조된 RVS를 2cm로 슬라이스 한 후, 슬라이스된 RVS 100g을 100 ° C의 물 1L에서 10 시간 동안 환류시켰다.

이 추출 절차는 두 번 반복되었습니다.

추출물을 Whatman 여과지 # 2를 통해 여과한 후 여과액을 동결 건조시켰다.

생성된 분말은 pre- Rhus verniciflua로 사용되었습니다.스톡스 추출물 (pRVSE).

 

농축되고 정제된 RVSE를 제조하기 위해 100g의 pRVSE를 1L의 95 % 에탄올에서 1 시간 동안 실온에서 환류시켰다.

추출물을 3,000 rpm에서 10 분 동안 원심 분리한 후 상층액을 수집하고 진공에서 60 ° C 이하에서 건조시켰다.

생성된 분말은 RVSE로 사용되었습니다.

pRVSE 및 RVSE 추출물은 추가 사용전까지 -20 ° C에 보관되었습니다.

 

 

 

간암

Rhus vernicifluaStokes에서정제된 플라보노이드의 선택적 항 증식 및 세포 사멸 효과가정상 간 세포주와 형질 전환된 간 세포주에미치는 영향    ( 참고 .)

이 연구에서는 Rhus verniciflua 의 미정제 아세톤 추출물에서 플라보노이드 함유 분획을 준비했습니다.

Stokes (RVS)는 전통적으로 식품 첨가물과 약초로 사용되며 RVS 클로로포름-메탄올 분획 (RCMF)으로 명명되었습니다.

 

이 연구는 RCMF가 형질 전환된 세포에서 선택적 성장 억제 및 세포 사멸 유도를 나타냄을 입증했습니다.

BNL SV A.8 세포는 MPHC 또는 BNL CL.2보다 RCMF 매개 세포 독성에 더 민감했습니다.

BNL SV A.8 세포에서 RCMF- 매개된 MnSOD 활성 및 글루타티온 (GSH) 함량 감소는 RCMF- 유도 세포 자멸사와 관련이있는 것으로 생각된다.

 

 

골암

플라보노이드 정제 Rhus verniciflua 스톡은 세포 성장을 적극적으로 억제하고 인간 골육종 세포에서 세포 사멸을 유도합니다.    ( 참고 )

 

신장암

Rhus verniciflua Stokes 추출물, 전이성 신 세포 암종 치료의 잠재적 옵션 : 2 건보고. (참고)

 

악성 흉막 중피종

한약 단독 치료 후 악성 흉막 중피종 환자에서 장기간 무 진행 생존율 : 증례보고

2020년 1월 발표. ( 참고 )

이 사례 보고서는 희귀하고 매우 공격적인 암인 악성 흉막 중피종 (MPM)을 앓고있는 49 세 남성에서 KHMT의 효능을 보여줍니다. KHMT=한방치료.

환자는 2017 년 12 월 cT3NxM0 III 기에서 재발성 흉막 삼출을 보였고 상피 MPM 진단을 받았습니다.

종합 치료팀은 흉막외 폐 절제술을 기반으로 한 복합 치료를 권장했지만 치료가 공격적이고 효과가 명확하지 않아 이를 거부했습니다. 

그는 상태가 악화되면 페메트렉스와 시스플라틴 화학 요법을 받기로 결정했습니다. 

 

그는 대체 치료 옵션을 위해 한의학 암 센터를 방문했습니다. 

2017 년 12 월부터 1 일 2 회 군칠단과 3 회 방암탕으로 구성된 KHMT 요법이 시작되었습니다. 

치료 21 개월 (2019 년 9 월)에 심각한 부작용이 발생하지 않았습니다. 

 

MPM 환자의 전체 생존 중앙값이 약 1 년이라는 점을 감안할 때이 환자의 21 개월 동안 진행되는 무 진행 생존은 비교적 길다. 따라서 이 사례는 KHMT가 MPM 환자에게 잠재적인 치료 옵션임을 시사합니다. 

치료 21 개월 (2019 년 9 월)에 심각한 부작용이 발생하지 않았습니다. 

 

군칠단은 알레르겐 우루시올이 제거된 옻 (RVS) 추출물 350mg을 함유한 캡슐 입니다. 

RVS의 항 종양 메카니즘은 항 혈관 형성일 가능성이 높습니다.

이는 혈관 내피 성장 인자를 통해 정상적으로 모집되는 세포의 증식 및 이동 활동을 억제합니다.

또한 MMP-2 및 MMP-9의 분비를 억제하여 암세포가 건강한 조직을 침범하는 능력을 감소시킵니다. 

 

방암탕은  : 

황기 24 g , 백출 12 g , 복령 12 g , 반하 12 g , 진피 12 g ,  박하  4 g , 택사 12 g ,  차전초(질경이)  8 g , 계혈등 (Spatholobus suberectus Dunn)  8 g , 대추  12 g ,  대두 8 g , 산사 6 g , 맥아 6 g , 오매  6 g  및 감초  6 g / d. 

 

이 혼합물은 위장 기능을 개선하고 면역 체계를 조절하는데 사용되었습니다. 

그것의 효능과 안전성은 진행된 암과 관련된 거식증에 대해 보고 되어 식욕을 개선하고 체중을 증가시킵니다.  

주성분인 황기는

성장 억제 및 종양 크기 감소를 포함하여 여러 가지 효과를 가지고 있습니다.

아폽토시스 촉진; 세포 증식, 혈관 신생, 세포 침습 및 전이의 억제; 화학 요법 약물 독성의 약화; 화학 요법 약물에 대한 민감도를 높입니다. 

 

 

대장암

한약 치료 후 직장암으로 인한 절제 불가능한 폐 전이의 완화 : 증례보고    (참고)

직장암으로 인한 폐 전이가 있는 57 세 아시아 남성의 사례를 소개합니다.

그는 처음에 원발성 병변의 절제술 (단계 IIA, T3N0M0)과 6주기의 보조 화학 요법을 받았습니다.

불행히도 약 1 년 후에 폐 전이가 확인되었습니다.

완화 화학 요법이 시작되었지만 그의 질병은 3주기 후에도 계속 진행되었고 화학 요법이 중단되었습니다.

 

환자는 독활 지황탕과 결합된 한약 표준화된 알레르겐 제거 옻 (RVS) 추출물로 단독 치료를 받았다.

한약 치료 7 주후 폐 전이가 현저하게 개선되었습니다.

폐 전이의 퇴행은 계속되고 있습니다.

또한 환자의 직장암은 재발하지 않았습니다.

그는 2 년 넘게 약초를 복용해 왔으며 부작용이 거의 관찰되지 않았습니다.

우리 환자에게 사용된 한약 요법은 직장암에 이차적인 폐 전이 치료에 유망한 후보자임을 시사하며, 이번 사례가 전이성 대장암 환자를 위한 한약 치료의 효능에 대한 추가 조사를 촉진하기를 희망합니다.

 

 

췌장암

알레르겐이 제거된 Rhus verniciflua Stokes는 JAK / STAT 및 Src / FAK 신호 경로의 하향 조절을 통해 췌장암 세포의 침입과 이동을 억제합니다.   (참고)

알레르겐이 제거된 Rhus verniciflua Stokes (aRVS)는 다양한 암세포에서 강력한 항 증식 효과가 있으며 독성이 낮기 때문에 암 치료를 위한 매력적인 후보로 떠오르고 있습니다. 

그러나 췌장암 치료제로 aRVS의 잠재적인 사용은 상대적으로 미흡합니다.

 

현재 연구는 췌장암 세포의 침입과 이동에 대한 aRVS의 효과를 조사하고 항암 효과의 기초가되는 분자 메커니즘을 확인했습니다.

aRVS는 췌장암 세포에서 Janus kinase / signal transducer 및 전사 경로 활성화 인자를 억제하고 뮤신 4의 단백질 발현을 감소 시켰습니다.

또한 초점 부착 키나아제 및 Src 신호의 활성화를 억제하고 matrix metalloproteinase 9의 발현을 감소 시켰습니다.

이는 췌장암 세포의 이동과 침입을 감소시킬 수 있습니다.

결론적으로, 본 연구는 aRVS가 공격적인 췌장암에 대한 잠재적인 치료가 될 수 있음을 시사했습니다.

 

 

유방암

Rhus verniciflua Stokes 추출물은 MCF-7 유방암 세포에서 p53 매개 세포 자멸사를 유도합니다 

( 참고 1)

 

RVSE는 sub-G1 단계에서 세포 사멸을 유도하여 용량 의존적으로 MCF-7 세포의 성장을 억제했습니다.

RVSE는 또한 세포 사멸 세포의 수를 유의하게 증가시켰고 용량 의존적으로 p53 및 p21의 발현을 증가시켰다.

또한, RVSE 처리는 MCF-7 세포에서 Bax : Bcl-2 비율과 절단된 카스파제 -3 및 -9 및 PARP와 같은 세포 자멸 관련 인자의 수준을 증가시켰다.

우리의 연구 결과는 MCF-7 세포에 대한 RVSE의 proapoptotic 효과가 p53, p21 및 고유 미토콘드리아 캐스케이드에 의해 매개된다는 것을 시사합니다. 

 

Butein은 암성 및 비암성 유방암 세포에서 phorbol 12-myristate 13-acetate 유도 COX-2 전사 활동을 하향 조절합니다.   (참고 2)

Butein은 Rhus verniciflua Stokes의 껍질과 Butea monosperma의 꽃에서 분리된 플라보노이드이며 염증과 암 치료를 위한 잠재적 치료제로 알려져 있습니다. 

사이클로 옥시게나제 (COX)는 아라키돈산을 프로스타노이드로 전환하고, 유방암 조직에서 이소형 COX-2의 발현 증가가 관찰되었습니다.

COX 억제제가 유방암 발생에 대한 화학 예방제로 사용될 수 있다는 것이 제안되었습니다.

 

이 연구는 비종 양성 MCF-10A 및 암성 MCF-7 유방암 세포에서 phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) 유도 COX-2 발현에 대한 플라보노이드의 잠재적 억제 효과를 조사했습니다.

Immunoblot 및 mRNA 분석은 10 μM 이하의 부테인이 이들 유방 세포에서 PMA- 유도 COX-2 발현을 유의하게 억제한다는 것을 보여 주었다.

PKC 신호 전달 경로의 차단이 기저 메커니즘인 것으로 나타났습니다.

부테인 처리는 인산 미토겐 활성화 단백질 키나아제 (MAPK) ERK-1 / 2의 양과 PKC의 총 활성을 감소 시켰습니다.

활성화된 ERK는 COX-2의 전사 활성화를 유발할 수 있습니다.

리포터 유전자 분석과 전기 영동 이동성 이동 분석 (EMSA)은 부테인이이 유전자의 전사를 억제함을 보여주었습니다.

이 연구는 부테인이 암성 및 비 암성 유방 세포 모두에서 PMA 유도 COX-2 발현을 하향 조절함을 보여 주며, 이러한 발견은 부 테인의 제약 개발을위한 기초를 제공 할 수 있습니다.

 

 

Rhus verniciflua Stokes의 칼콘 부테인은 섬유 아세포와 함께 배양된 인간 유방암 세포의 클론 생성 성장을 억제합니다  (참고 3)

식물성 폴리페놀인 부테인 (3,4,2 ', 4'-tetrahydroxychalone)은 Rhus verniciflua Stokes 줄기의 주요 생물학적 활성 성분입니다. 

최근 부테인은 섬유 아세포의 기능을 억제하는 것으로 나타났습니다. 

섬유 아세포는 유방암 세포의 성장을 촉진하는데 중요한 역할을 하는 것으로 여겨지기 때문에, 우리는 체외에서 섬유 아세포와 함께 배양된 소수의 유방암 세포의 클론 생성 성장을 억제하는 부테인의 능력을 조사했습니다.

 

우리가 테스트한 5 가지 섬유 아세포 기능 조절제 중 부테인은 섬유 아세포와 함께 배양된 UACC-812 유방암 세포의 클론 생성 성장을 억제하는 가장 강력한 억제제였습니다. 

2.5 microg / mL 정도로 낮은 농도의 부테인을 가진 섬유 아세포의 전처리는 섬유 아세포와 함께 배양된 UACC-812 유방암 세포의 후속 클론 생성 성장을 거의 폐지했습니다.

유사한 용량의 부테인은 섬유 아세포가 없는 상태에서 배양된 유방암 세포의 클론 생성 성장에 영향을 미치지 않았습니다.

중요한 것은, 종양 세포가 고정된 용량의 부테인으로 전처리된 섬유 아세포와 함께 배양되었을 때 원발성 유방암 세포의 클론 생성 성장도 현저하게 감소하거나 폐지되었다는 것입니다.

 

이러한 결과는 천연 한약재인 부테인에 의한 섬유 아세포와 유방암 세포의 상호 작용에 대한 간섭이 유방암의 미세 전이의 성장을 억제할 수 있는 새로운 실험적 접근법으로 더 연구되어야 함을 시사한다.

 

 

난소암

Rhus verniciflua Stokes (RVS)와 부테인은 AKT 인산화 억제를 통해 파클리탁셀 내성 SKOV-3 / PAX 난소암 세포의 세포 사멸을 유도합니다. ( 참고 )

RVS의 주요 화합물인 RVS와 부테인은 암세포에서 AKT 억제를 통해 세포 사멸을 유도하는 것으로 알려져 있습니다. 

따라서 본 연구에서는 SKOV-3 / PAX 세포에서 RVS와 그 유도체 화합물 (fisetin, quercetin, butein)이 세포 사멸에 미치는 영향을 조사했습니다.

RVS의 80 % 에탄올 추출물과 그 유도체 화합물 (피세틴, 케르세틴, 부테인)을 준비했습니다. 

 

우리는 RVS와 부테인이 용량 의존적으로 SKOV-3 / PAX 세포의 성장을 억제한다는 것을 발견했습니다. 

우리는 또한 RVS와 부테인이 caspase-9, -8, -3 및 PARP의 절단을 생성한다는 것을 발견했습니다.

유사하게, sub-G 1 단계 및 Annexin V-FITC 양성 세포는 RVS 및 부테인에 의해 증가되었습니다.

더욱이, RVS와 부테인은 SKOV-3 / PAX 세포에서 AKT 인산화를 상당히 감소시켰다.

PI3K 억제제 LY294002는 우리의 발견을 뒷받침하는 PARP 절단을 일으켰습니다.

 

우리의 데이터는 RVS와 부테인이 AKT 활성화의 억제를 통해 SKOV-3 / PAX 세포의 세포 사멸을 유도한다는 것을 분명히 나타냅니다. 

RVS와 부테인은 파클리탁셀 내성 난소암 치료에 유용한 화합물이 될 수 있습니다.

 

RVS 추출물 및 화합물의 준비

본 연구에 사용된 RVS의 80 % 에탄올 추출물은 한풍제약 (대한민국 전주)에서 제공한 것입니다. 

분말 형태의 RVS를 30 % 에탄올에 용해시켜 저장 용액을 만들고 사용 준비가 될 때까지 -80 ° C에 보관했습니다. 

피세틴 (PubChem CID : 5281614) 및 케르세틴 (PubChem CID : 5280343)은 Sigma (미주리 주 세인트루이스)에서 구입했습니다.

Butein (PubChem CID : 5281222)은 Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA)에서 구입했습니다.